INTRODUÇÃO

Trabalhadores da indústria naval estão expostos a diferentes substâncias químicas, como solventes presentes nas tintas e vernizes e metais presentes nas poeiras e fumos metálicos. Todos provocam irritações na pele e mucosas, podendo causar dermatites e também distúrbios respiratórios e hepáticos, neoplasias, danos ao sistema nervoso central e pneumoconioses quando inalados ¹ .

Outro fator de risco para esses trabalhadores é a exposição a ruídos, em associação a substâncias químicas e temperaturas extremas nos locais confinados do ambiente de trabalho dos estaleiros, indutores de alterações e perdas auditivas ^1-3 . O impacto negativo causado pela deficiência auditiva pode repercutir nas relações pessoais, no equilíbrio emocional, nas interações sociais ou ocupacionais do trabalhador. Os efeitos extra-auditivos do ruído podem levar a alterações do aparelho circulatório, digestivo, muscular, sistema nervoso, interferência no sono, distúrbio de equilíbrio (tonturas), problemas psicológicos, dores de cabeça, mudanças repentinas de humor, ansiedade, surgimento de zumbidos e baixo rendimento no trabalho ⁴ .

Doenças decorrentes de exposições ocupacionais e ambientais têm sido detectadas ao nível celular e molecular para posterior controle e prevenção ^5,6 . Os testes citogenéticos, que utilizam células cultivadas ou retiradas de animais ou indivíduos submetidos a exposições, revelam dois tipos de substâncias mutagênicas: as clastogênicas, que produzem aberrações cromossômicas estruturais, e aquelas que interferem na formação do fuso mitótico, provocando alterações na distribuição dos cromossomos e causando aneuploidias, as aberrações numéricas ^7-10 . Biomarcadores citogenéticos em linfócitos periféricos, como as aberrações cromossômicas, têm sido usados para avaliar a exposição ocupacional a agentes carcinogênicos ou mutagênicos ^10,11 . Em geral, as mutações cromossômicas são eventos causais no desenvolvimento de neoplasias, e o aumento em danos nos cromossomos pode refletir um aumento no risco de câncer ^6,8 . A aplicação da pesquisa de citotoxicidade e genotoxicidade em estudos populacionais com exposições a substâncias clastrogênicas pode contribuir para o conhecimento do potencial carcinogênico das substâncias em humanos ¹² .

Considerando a exposição ocupacional na indústria naval, há mais de quinze anos o Centro de Estudos da Saúde do Trabalhador e Ecologia Humana (CESTEH) da Escola Nacional de Saúde Pública Sergio Arouca (ENSP), Fundação Oswaldo Cruz, tem desenvolvido alguns estudos de avaliação da exposição ocupacional em estaleiros no Estado do Rio de Janeiro ^1,13-16 . Nesse contexto, encontra-se este trabalho, que teve como objetivo avaliar a exposição de pintores de um estaleiro a solventes e metais, e identificar possíveis alterações respiratórias, auditivas e citogenéticas, caracterizadas pela ocorrência de aberrações cromossômicas.

MÉTODOS

O grupo exposto avaliado neste estudo foi composto por uma amostra de conveniência de pintores (n=18) de um estaleiro em Angra dos Reis, RJ. Tratou-se de um estudo observacional transversal, tendo como critérios de inclusão: trabalhadores em contato com a tinta utilizada no estaleiro, idade acima de 18 anos e tempo de trabalho mínimo de 6 meses no estaleiro. Excluíram-se os trabalhadores que apresentaram comorbidades preexistentes à entrada no estaleiro e durante os seis primeiros meses de trabalho assim como aqueles que usavam medicamentos antineoplásicos e com realização de exame de raio-X no último mês. Um questionário solicitou informações sociodemográficas e sobre consumo de álcool, fumo e hábitos de lazer, bem como uso de medicamentos, exames realizados e doenças preexistentes. Estes dados foram importantes para a identificação de fatores de confundimento na análise citogenética. Nenhum indivíduo foi excluído do estudo devido ao hábito de fumar ou ingerir bebida alcoólica. O estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa da Fiocruz sob o número CAAE: 0037.0.031.000-06, e os participantes assinaram termo de consentimento.

Os trabalhadores realizaram os testes audiológicos, pneumológicos e dos indicadores biológicos no CESTEH/ENSP/Fiocruz, RJ. Os exames hematológicos foram realizados pelo Laboratório de Análises Clínicas do Instituto Nacional de Infectologia Evandro Chagas/Fiocruz, RJ.

RESULTADOS

Participaram do estudo 18 trabalhadores do sexo masculino, que apresentavam quadro alérgico, sintomas de pele e pulmonares, sendo praticamente 90% pintores ou exerciam atividades relacionadas à pintura de navios e plataformas petrolíferas. O tempo de trabalho na atividade variava de 2 a 30 anos (média = 14 anos), com carga horária de trabalho semanal de 44h. Entre os trabalhadores, 65% possuíam ensino fundamental incompleto, 20% informaram ser fumantes (média de 25 cigarros/dia) e 65% relataram ingerir bebida alcoólica socialmente.

Os equipamentos de proteção individual (EPIs) foram descritos como de uso frequente. Os trabalhadores não levavam o uniforme para casa e utilizavam macacão descartável em alguns processos de pintura. Foram identificados vários trabalhadores com dermatoses, embora fizessem uso de EPIs, tais como macacão hidrorrepelente descartável, máscara (carvão), luva de cano longo, protetor auricular, botas e óculos.

Os trabalhadores relataram nunca ter usado medicamentos antineoplásicos e haver feito exames de raio-X, em média, há mais de um mês. No entanto, vários citaram o uso de medicamentos para alergias respiratórias e dermatológicas. As avaliações clínicas constataram que a grande maioria destes trabalhadores apresentava dermatoses, pneumopatias e problemas auditivos relacionados às atividades laborais. Foram relatados casos de adoecimento e exposição no processo de pintura, bem como a relação de conflitos entre a empresa e o INSS quanto aos encaminhamentos dos casos dos trabalhadores com doenças ocupacionais.

Do total de nove trabalhadores avaliados para função pulmonar, seis se encontravam com alteração funcional respiratória (distúrbio ventilatório obstrutivo). Neste grupo, foram diagnosticados quatro casos de asma, além de um caso de silicose e três com radiologia suspeita. Apesar do número de trabalhadores avaliados não ser grande, é possível observar que a maioria apresentava sérios problemas pulmonares relacionados ao trabalho. Essas alterações podem representar os danos gerados pelas exposições ocupacionais, como tintas entre pintores, semelhantes à asma ocupacional com padrão de obstrução. Entre casos analisados, apenas três apresentaram exames funcionais e radiológicos normais.

Com relação à avaliação audiológica, somente 50% dos 18 trabalhadores avaliados consideravam sua audição normal; 30% pouco reduzida e 20% muito reduzida. O grupo de trabalhadores apresentou 67% de perda auditiva induzida pelo ruído (PAIR) com alterações extra-auditivas, como a presença de zumbido, relatada por 60% dos trabalhadores (5% sempre, 25% frequentemente e 30% raramente), e tontura relatada por 65% deles. Com relação aos impactos psicossociais avaliados pelo questionário decorrentes da perda auditiva, 10% dos trabalhadores relataram que sua audição interferia no seu desempenho, 15% na sua vida social e 35% nas oportunidades. Foram também avaliados os Índices de Reconhecimento da Fala (IRF) para ambas as orelhas de 18 trabalhadores, sendo obtidos os resultados de 91,8 ± 7,7 para orelha direita e 92,8 ± 12,7 para orelha esquerda. A Tabela 1 relaciona os achados audiológicos com os valores de Pb-S e Mn-S. Além de encontrar trabalhadores com indicativos de PAIR, foi observada uma diferença significativa entre as médias de chumbo em sangue nos trabalhadores com laudo indicativo de PAIR e aqueles com limites aceitáveis.

A Tabela 2 apresenta os valores dos indicadores biológicos de exposição ao Pb e Mn. Quatro trabalhadores (22,2%) tiveram o percentual de recuperação da enzima ALAD (média = 41,6%) igual ou acima do IBM de 40% ²⁰ . A média para todo o grupo foi de 32,9%. Os níveis de ALA-U apresentaram média de 1,7 mg g^-1 creatinina no grupo exposto, e um trabalhador deste grupo apresentou nível igual a 4,2 mg g^-1 creatinina, além de uma concentração Pb-S de 7,6 μg dL^-1. O nível de chumbo no sangue dos trabalhadores comportou-se de forma semelhante ao ALA-U, com média de 4,6 ± 1,7 μg dL ^-1 (faixa 1,9-9,1 μg dL^-1). Com relação à concentração de Mn-S, o grupo exposto apresentou média de 10 ± 2,6 μg L^-1 (faixa 5,5-15,3 μg L^-1).

Na observação de alterações citogenéticas, as amostras de 13 trabalhadores do estaleiro foram analisadas. As alterações observadas foram aneuploidias, separação prematura centromérica (SPC) e aberrações cromossômicas (AC), como anel, quebras, união de cromátides irmãs, mostradas na Tabela 3 . Foram avaliadas 808 metáfases, com total de 630 válidas, e encontradas alterações como anéis (2), quebras cromatídica (1) e cromossômica (1). Com relação às SPCs, um trabalhador apresentou valor excessivo, distante da média do grupo exposto. Este indivíduo, que já apresentava distúrbios hematológicos importantes como leucopenia e valores elevados da célula bastão, foi encaminhado para acompanhamento clínico mais rigoroso. Foram encontradas correlações positivas e significativas entre aneuploidias e SPCs (r=0,463; p=0,013), bem como entre aneuploidias e ACs (r=0,533; p=0,003).

A Tabela 4 apresenta a comparação entre os resultados de alterações citogenéticas encontradas neste estudo com os mesmos testes avaliados em uma população considerada normal, descrita na literatura ²¹ . Os valores do χ2 encontrados para aneuploidia e SPC foram 100,01 e 321,0 (p<0,001), respectivamente. Com relação a ACs, os valores encontrados foram χ2 = 8,61 para o grupo de trabalhadores do estaleiro e χ2 = 13,61 para todos os indivíduos (p<0,01).

A Tabela 5 mostra os resultados dos indicadores respiratórios, audiológicos e citogenéticos para cada um dos 18 trabalhadores do estaleiro avaliados no estudo. A avaliação conjunta de todos os indicadores do grupo de trabalhadores, controlada por idade e tabagismo, mostrou correlação significativa entre os resultados de ALA-D ativada e Mn-S (r = 0,756; p = 0,030) e entre IRF-OD e Pb-S (r = -0,621; p = 0,006). A correlação entre os resultados de ALA-D ativada e a presença de aberrações cromossômicas ficou próxima da significância estatística (r = −0,677; p = 0,065), assim como a correlação entre os resultados de IRF-OD e SPC (r = 0,536; p = 0,059). Os demais indicadores não apresentaram correlação estatisticamente significativa.

DISCUSSÃO

Neste estudo, foram avaliadas alterações respiratórias, auditivas e citogenéticas em pintores de um estaleiro em Angra dos Reis, expostos a solventes e metais. Compostos de metais, como o chumbo e manganês, são muito usados como pigmentos para tintas ²² . Recentemente, o limite máximo permitido de chumbo no Brasil, para tintas imobiliárias, de uso infantil e escolar, vernizes e materiais similares de revestimento de superfícies, foi limitado a uma concentração igual ou superior a 0,06% (p/p) (Lei n^o 11.762/2008), que ainda pode ser considerado alto em comparação com outros países, onde o chumbo é proibido em tintas domésticas. Por outro lado, fumaça, poeira e aerossóis de processamento metalúrgico, fundição de aço, soldagem e corte de metal liberam óxido de manganês para o ambiente ²³ .

Diversos tipos de solventes podem ser adicionados às tintas com o objetivo de torná-las mais fluidas. Tolueno e benzeno estão entre os mais utilizados por trabalhadores ocupacionalmente expostos a solventes aromáticos e considerados genotóxicos ^11,24-26 . O benzeno é considerado um carcinógeno humano, com atividade clastogênica ²⁵ . O tolueno é considerado ototóxico, com evidências de interação com ruído; já o potencial ototóxico do benzeno pode ser considerado inconclusivo ²⁷ . De acordo com os protocolos das Normas e Manuais Técnicos do Ministério da Saúde relacionados à exposição ocupacional ao benzeno ^28,29 , as avaliações de PAIR e de alterações cromossômicas, entre outras, devem ser realizadas em trabalhadores que utilizam este composto em seu processo de trabalho. A composição dos pigmentos, solventes e tintas mudam conforme a necessidade do processo. Desse modo, os trabalhadores estão sempre expostos a diferentes substâncias químicas. Em geral, o maior risco na exposição às substâncias químicas se deve a processos que envolvam a formação de aerossóis, pós e poeiras, e fumos, daí a necessidade de avaliar provas de função pulmonar na investigação de doenças ocupacionais respiratórias relacionados ao processo de trabalho investigado, assim como no estabelecimento de incapacidade em pacientes com pneumoconiose ¹⁴ .

Dos 18 participantes, apenas uma parte dos trabalhadores aceitaram participar das avaliações pneumológicas, audiológicas, de exposição a metais e aberrações cromossômicas. Esse grupo de trabalhadores pode ter continuado no estudo, devido a problemas de saúde que não haviam sido investigados anteriormente, mas não podem representar o estado de saúde de todos os trabalhadores de estaleiros (viés de seleção). Não foram encontrados na literatura trabalhos que avaliem concomitantemente alterações citogenéticas e auditivas em trabalhadores expostos a solventes como benzeno e tolueno e metais, embora estas avaliações sejam indicadas nas Normas e Manuais Técnicos do Ministério da Saúde, tendo em vista as dificuldades de sua avaliação. Os testes de aberrações cromossômicas foram realizados em um número reduzido de pintores, dada a dificuldade técnica, que apesar de seu enorme potencial na saúde ocupacional e biomonitoramento, poucos são os trabalhos que os empregam, especialmente no Brasil.

Há na literatura alguns estudos em populações brasileiras que mostram a exposição ocupacional de ruído associado a substâncias químicas, como metais pesados, agrotóxicos/inseticidas, solventes e gases (como monóxido de carbono) ^30-41 . As interações desses agentes com o ruído devem ser avaliadas cuidadosamente e incluídas nos programas de prevenção à perda auditiva ^42,43 .

O grupo de trabalhadores do estaleiro apresentou interferência do ruído na vida laboral e social. Os trabalhadores apresentaram IRF menores para as duas orelhas, evidenciando influências na fala. A percepção dos sons da fala depende de um sistema auditivo perceptual periférico íntegro, o que não ocorre nas perdas auditivas neurossensoriais investigadas neste estudo. Esse tipo de comprometimento auditivo afeta inicialmente frequências altas, levando a uma dificuldade acentuada na percepção da inteligibilidade da fala. Nos casos de perda auditiva induzida por ruído, são comuns as dificuldades de diferenciar os sons da fala e de compreender uma mensagem, que aumentam consideravelmente quando o trabalhador encontra-se em ambiente ruidoso. À medida que a lesão auditiva avança para frequências mais graves, afeta a percepção de palavras faladas de longe. Circunstâncias ambientais desfavoráveis reduzem a capacidade de distinguir detalhes dos sons da fala, pois o mascaramento e a reverberação ambientais afetam os mecanismos de compensação, reduzindo a inteligibilidade. O ruído, por seus efeitos de mascaramento sobre a palavra ou outros sinais sonoros úteis como alarmes, pode dar origem a acidentes profissionais ⁴² .

Os efeitos do chumbo sobre o sistema auditivo vêm sendo investigados por alguns pesquisadores ^30,44,45 . Existem inúmeros estudos acerca dos efeitos da contaminação pelo chumbo no organismo, demonstrando que múltiplos órgãos podem ser afetados. Entretanto, pesquisas sobre os efeitos do chumbo no sistema auditivo e exposição simultânea ao chumbo e outros agentes, como o ruído, são escassas, além de apresentarem resultados contraditórios ^30,44 . Correlações significativas entre os níveis de chumbo em sangue e os limiares auditivos foram descritas em diferentes exposições ocupacionais ⁴⁴ . No atual estudo com trabalhadores do estaleiro, foi verificada associação entre a perda auditiva e a presença de chumbo no sangue, embora os resultados de Pb-S encontrados para os trabalhadores estejam abaixo dos limites adotado pela NR-7 ⁴⁶ , que estabelece valor de referência de 40 µg dL^-1 para pessoas não expostas, e índice biológico máximo permitido (IBMP) de 60 µg dL^-1, limite para pessoas expostas ocupacionalmente, pois acima dele são verificados efeitos na saúde. Os limites indicados por algumas agências americanas, como OSHA ⁴⁷ e ACGIH ⁴⁸ , são também altos, visto que o valor de referência para chumbo em sangue é de 30 µg dL^-1. Entretanto, estes valores estão muito longe de serem seguros, pois a inibição da ALAD já ocorre em torno de 20 µg dL^-123 . A NIOSH ⁴⁹ reconhece que os níveis de chumbo no sangue para adultos são elevados e recomenda que sejam reduzidos para < 25 µg dL^-1. Ainda assim, os resultados deste trabalho indicam perda auditiva nos trabalhadores para valores de Pb-S muito inferiores aos indicados nestas legislações.

Ainda há um hiato no que se refere aos limites biológicos seguros para a exposição ao Mn ⁵⁰ . O uso de Mn-S é aconselhado para estudos de base populacional, e não no monitoramento biológico individual ^19,50 . Na Comunidade Europeia foram encontrados níveis de Mn variando de 7,1-10,5 μg L^-1 em sangue e 0,12-1,9 μg L^-1 em urina na população em geral ⁵¹ . Uma pesquisa realizada com trabalhadores de uma oficina de tratamento de superfície para recuperação de armamento encontrou teores de Mn-S variando de 4,34-7,50 µg L^{-1 19}. Outro estudo determinou a concentração de Mn-S de 23 trabalhadores de um estaleiro, também em Angra dos Reis/RJ ¹⁶ , encontrando valores mínimo e máximo iguais a 4,92 e 22,04 µg L ^-1, respectivamente. A legislação brasileira não possui limites biológicos deste metal, visto que a NR-7 ⁴⁶ não os cita. No entanto, os valores de referência da ATSDR ⁵² para Mn-S em grupos não expostos ocupacionalmente encontram-se na faixa de 4-15 µg L^-1.

A avaliação do grupo exposto apontou para um elevado índice de casos de pneumonia. Os alvos primários, após exposições crônicas ao manganês e seus compostos, são os pulmões e o cérebro. Alta incidência de pneumonia foi associada com concentrações acima de 210 μg L^-1 de manganês no ambiente de trabalho ²² . Uma avaliação mais precisa deve ser conduzida para se assegurar que o grupo de trabalhadores do estaleiro seja considerado ocupacionalmente exposto ao Mn.

Com relação aos resultados dos indicadores de efeito, embora os níveis de ALA-U obtidos no grupo de trabalhadores do estaleiro estivessem abaixo do valor empregado como referência (4,5 mg g^-1 creatinina) pela NR-7 ⁴⁶ , um trabalhador desse grupo apresentou um resultado próximo desse valor limite (4,2 mg g^-1 creatinina) e concentração Pb-S de 7,6 μg dL ^-1, podendo indicar uma exposição ocupacional ou ambiental ao chumbo ⁵³ .

Estudos de mortalidade por câncer em humanos, tentando correlacionar exposição crônica a chumbo e ocorrência de câncer, têm mostrado um moderado poder de predição específica do risco relacionado ao metal, devido às populações expostas sofrerem diversas outras exposições sobrepostas a carcinógenos, como arsênio, cromo hexavalente, cádmio, além dos hidrocarbonetos aromáticos e tabagismo ²³ . A IARC ⁵⁴ classifica os compostos inorgânicos de chumbo no grupo 2A, i.e., provavelmente carcinogênico para humanos, visto que o grau de evidência de carcinogenicidade em humanos é quase suficiente, enquanto e as evidências já são comprovadas em animais. Os resultados encontrados mostraram que os trabalhadores do estaleiro se encontravam expostos ocupacionalmente aos compostos inorgânicos de chumbo.

Alterações cromossômicas como as observadas nos trabalhadores do estaleiro são biomarcadores bem estabelecidos de exposição ocupacional e ambiental a agentes genotóxicos. Tem sido proposto que a frequência de aberrações cromossômicas em linfócitos de sangue periférico possa servir não só como indicador de exposição a mutagênicos, como também indicador de danos genéticos com relevância no processo carcinogênico ^6,8 . Por exemplo, trabalhadores expostos ocupacionalmente a substâncias como benzeno e outros solventes orgânicos têm uma maior incidência de aberrações cromossômicas em comparação à população em geral ⁸ . Essas alterações citogenéticas são também utilizadas como indicadores de efeitos precoces nos estudos de monitoramento biológico em populações expostas a diversos agentes genotóxicos ^7,10 , como verificado em (poucos) estudos brasileiros ^55-65 .

Neste estudo com os trabalhadores do estaleiro, a aneuploidia, avaliada no teste de aberrações cromossômicas, apresentou alta correlação com as outras alterações citogenéticas. As alterações citogenéticas apresentadas foram diferentes daquelas encontradas no grupo controle da pesquisa de Major et al. ²¹ , cuja frequência de aneuploidias foi de 6,7%. O presente estudo encontrou 16,7% no grupo de trabalhadores do estaleiro, podendo ser uma evidência de que esses trabalhadores estavam expostos ocupacionalmente a substâncias clastogênicas. Vários estudos indicam que a instabilidade cromossômica, que pode significar falhas na separação mitótica, seja a causa principal da aneuploidia, característica comum das células cancerosas. A presença desses cromossomos extras (na maioria das vezes, essas células cancerosas possuem mais de 100) faz com que as células sejam instáveis, causando alterações severas no controle da divisão celular. A instabilidade cromossômica é uma característica comum em tumores de humanos, podendo resultar de defeitos na segregação cromossômica, na estabilidade do telômero, na regulação do ciclo celular, ou no reparo de DNA. Em células normais, vários sistemas corrigem os acoplamentos anômalos entre os cinetócoros e o fuso mitótico ^6,9,15 .

Major et al. ²¹ sugerem que as SPCs podem ser desenvolvidas como um novo indicador citogenético relacionado à exposição, principalmente em avaliações do risco de câncer ocupacional, sendo sua utilização mais adequada para este tipo de análise. Os autores sugeriram, ainda, a condução de investigações epidemiológicas de estudos prospectivos e citogenéticos da relação das SPCs com a exposição às substâncias químicas utilizadas nos ambientes de trabalho ²¹ . A ideia de associação causal entre aberrações cromossômicas (numéricas e estruturais) e risco para câncer está baseada no conceito de que danos genéticos em linfócitos de sangue periférico refletem danos similares em células envolvidas nos processos carcinogênicos ⁷ . Portanto, a alta frequência de aneuploidias no grupo de trabalhadores do estaleiro indica a possibilidade de desenvolvimento de processos de carcinogenicidade.

CONCLUSÕES

Foram observadas alterações respiratórias e perda auditiva periférica de origem ocupacional no grupo de trabalhadores do estaleiro avaliado, com associação entre a PAIR e a concentração de chumbo em sangue. Os resultados indicam que a aneuploidia pode ser uma importante ferramenta na avaliação da citotoxicidade e exposição ocupacional a substâncias clastogênicas.

Deve ser realizado um programa para avaliação da exposição ocupacional nos estaleiros que permita orientar o estabelecimento de medidas que visem eliminar a exposição dos trabalhadores, como o emprego de processos automatizados, ou pelo menos limitar a exposição, melhorando a ventilação do local, a proteção respiratória individual e o uso de tintas seguras.